11月来，有家科创板IPO公司上会被暂缓。
这公司全称是，上海荣盛生物药业股份有限公司（荣盛生物），这是一家以水痘疫苗为业务主体的疫苗领域公司。
招股书信息显示，至年，荣盛生物水痘减毒活疫苗贡献收入比重不断上升，由42.17%提升至82.05%。
从数据看，荣盛生物成立至今唯一一款上市的疫苗是水痘疫苗，产品结构单一且市场占有率较低，年至年期间，荣盛生物获得水痘疫苗批签发数量占比分别为1.87%、4.06%和6.70%，与可比公司存在一定差距。
此次赴科创板拟募集的12.5亿元，也将用于疫苗研发及产业化等项目。
在首发上会过程中，上市委对公司进行了十连问，要求公司去落实问题。
知情郎，看完现场问询问题，也头大，都到上会阶段了，还被问那么多问题，肯定IPO悬了。
当然，知情郎不是从财务、市场角度来看待荣盛生物IPO被暂缓的事儿，而是从专利的维度。
从披露的信息看，公司目前拥有包括已授权以及在申请的专利近50项，除水痘疫苗产品外，公司还拥有免疫及生化诊断试剂近60项产品。
在疫苗领域，年，荣盛公司成功上市拥有国家发明专利的“韦可邦水痘减毒活疫苗”，基于公司先进的细胞工厂平台，生产过程中不添加明胶和人血白蛋白等关键工艺以及相较于药典更为严格的产品注册标准，“韦可邦水痘减毒活疫苗”以极低的不良反应发生率受到青睐。
有一说一，这公司拿的出手的产品就是水痘疫苗，看看他疫苗的最新专利，还是很有一手的，虽说IPO毛病多被暂缓，但也不能顺带否定了人家的技术能力。
水痘这病范围广，小孩子都要打！
水痘专利制备法
专利名：一种水痘-带状疱疹病毒活疫苗原液的制备方法
公开(公告)号：CNA
公开(公告)日：-10-25
摘要：本发明提供了一种水痘带状疱疹病毒活疫苗原液的制备方法，所述方法包括病毒生产、细胞破碎、超滤膜浓缩以及分子筛层析的步骤，期间进行适时的病毒保护以及温度调节。采用本发明的制备方法，活疫苗产量高、安全风险低。
背景技术介绍
水痘带状疱疹病毒是一种具有高度传染性的疱疹病毒，既可引发水痘，也可引发带状疱疹(HZ)；前者通常见于儿童期和年轻成年人，后者则是潜伏病毒再活化和复制导致。水痘是一种常见、多发、有高度接触传播性的儿童急性传染病，发热的同时伴全身水疱性发疹。带状疱疹(HZ)是由潜伏在感觉神经节的水痘带状疱疹病毒复发感染导致的一种急性感染性皮肤疾病。当抵抗力低下或劳累、感染、感冒时，病毒可再次生长繁殖，并沿神经纤维移至皮肤，使受侵犯的神经和皮肤产生强烈的炎症。常见的严重并发症有疱疹感染后神经痛(PHN)和眼病带状疱疹。
现有的水痘带状疱疹病毒疫苗类型较少，在韩国获得许可的疫苗是从一种来自当地的特定分离株开发而来；除此之外，所有的配方都基于日本Takahash分离的VZVOka株。鉴于此类病毒疫苗制备工艺难度高，全球仅有2种批准上市的带状疱疹疫苗，其一为默克公司的Zostavax疫苗，于年获得上市许可，实质为高剂量VZVOka株减毒活疫苗。
另一为葛兰素史克(GSK)公司的亚单位佐剂疫苗(HZ/SU)，结合了VZV糖蛋白gE和含有刺激先天性免疫反应激活的AS01B佐剂以增强特异性抗体和细胞介导的反应，以期诱导更强烈和更持久的免疫反应；但是，该亚单位疫苗的副反应比较强。
因重组亚单位疫苗的副反应较强，减毒活疫苗的规模化生产、工艺优化显得更为迫切。
目前，病毒减毒活疫苗生产原液的纯化工艺中，主要采用超声破碎、离心、过滤制备减毒活疫苗原液，在减毒活疫苗原液及成品溶液的过滤处理中，主要采用滤柱过滤和布式滤囊过滤两种方法。尽管这两种方法在实际生产中的应用已较成熟和稳定，但所获得的病毒减毒活疫苗原液还存在一些亟待改善的方面，主要是细胞/病毒培养过程中的杂质依然不能有效去除。尽管可采用MRC5细来生产病毒，该细胞为人源细胞，但对人体来说，依然是外源性物质，产生较多副反应。目前，包括默克在内的已上市疫苗，只是采用离心或过滤的方式去除较大的细胞碎片，均存在该潜在的安全性问题。
本发明人致力于优化水痘带状疱疹病毒活疫苗的纯化工艺。不同于其它类型的疫苗(例如灭活疫苗，蛋白疫苗等)，本发明所需制备的疫苗为病毒活疫苗。尽管在其它类型的病毒疫苗制备中可能无需考虑，但对于病毒活疫苗而言，如何保持病毒的高活性是至关重要的。在病毒活疫苗的整个制备和纯化工艺中，一方面需要尽可能地避免或减少病毒失活；另一方面则是尽可能地达到高的蛋白去除率。
专利亮点，蛋白去除率
蛋白去除率是大规模生产水痘疫苗的核心。
为了解决蛋白去除率低的问题，本发明人进行了深入研究分析，确定通过在过程中适时利用添加剂进行活性保护并引入层析工艺的方案。
本发明人观测到层析工艺会导致活病毒的活性丧失，为了解决这一问题，本发明人进行了上游工艺的优化，应用有效的添加成分(人血白蛋白)并在特定节点适时加入。在经水痘带状疱疹病毒感染、收集细胞液的阶段(细胞破碎前)，在病毒收集液中添加如表3中的含有人血白蛋白的添加成分；进而再进行细胞超声破碎、离心去除杂质(超滤前)，与不添加时(病毒滴度为5.2LgPFU/ml)相比，适时添加人血白蛋白使得病毒滴度有提高(5.55.8LgPFU/ml)。超滤浓缩约10倍后，再制备的纯化液，病毒滴度可达6.6LgPFU/ml，比之不添加人血白蛋白提高显著。进一步地进行层析，此过程尽管在传统上并认为会导致病毒失活，但本发明在工艺优化后，比之超滤浓缩后病毒滴度有一定损失、但仍然维持高位，可达6.1LgPFU/ml(病毒回收率略有降低)。这样的滴度仍然可保证后期配制出适宜滴度的疱疹和水痘疫苗。
在保证滴度的情况下，优化工艺后蛋白质的去除率令人意外地升至99％以上(上表)，保证了疫苗的纯度。
因此，优选的纯化过程为：收集病毒液，超声破碎，超滤浓缩后得病毒浓缩液，经分子筛层析，制得原液。
本发明人考察了在细胞收集液中分别加入1‰、3‰、5‰不同浓度人血白蛋白后制备的超声破碎后病毒液、浓缩液、纯化液、原液中的病毒滴度，结果呈现明显高于不添加人血白蛋白。由于3‰、5‰浓度的人血白蛋白的病毒滴度结果接近，基于成本/收益方面考虑，选择添加3‰浓度的人血白蛋白相对更有优势。
关于添加时机，含有人血白蛋白的试剂在病毒收集后添加，本发明人考察了多个阶段添加效果后发现，在收获病毒收集液(感染病毒的细胞液)后、超声破碎前添加含有人血白蛋白的试剂，最终可以最好的病毒活性、蛋白去除率令人满意。在分子筛层析前后的样液中添加“谷氨酸钠+蔗糖”而无需再加入人血白蛋白；并且前期添加的少量人血白蛋白在层析过程中恰好被去除。如此，这一技术方案可以最大限度地保护病毒活性，且最大限度地去除蛋白。
